Шинэ коронавирус (SARS-CoV-2) Бодит цагийн ПГУ-ын иж бүрдэл
Энэхүү маш мэдрэмтгий, хэрэглэхэд бэлэн ПГУ-ын иж бүрдэл нь лиофильжүүлсэн форматаар (хөлдөөж хатаах процесс) удаан хугацаагаар хадгалах боломжтой.Уг иж бүрдлийг тасалгааны температурт тээвэрлэж, хадгалах боломжтой бөгөөд нэг жилийн турш тогтвортой байна.Урьдчилсан хольцын хоолой бүр нь урвуу транскриптаза, Так полимераз, праймер, датчик, dNTPs субстрат зэрэг ПГУ-ын олшруулалтад шаардлагатай бүх урвалжуудыг агуулна.Үүнд зөвхөн 13ул нэрмэл ус, олборлосон РНХ-ийн 5ул загвар нэмэхэд л ПГУ-ын багаж дээр ажиллуулж, өсгөж болно.
qPCR машин нь дараах шаардлагыг хангасан байх ёстой.
1. 8 тууз бүхий ПГУ-ын гуурсан хоолойн эзэлхүүн 0.2 мл
2. Дөрөвөөс илүү илрүүлэх сувагтай байх:
Суваг | Өдөөлт (нм) | Ялгарал (нм) | Урьдчилан тохируулсан будагч бодис |
1. | 470 | 525 | FAM, SYBR Green I |
2 | 523 | 564 | VIC, HEX, TET, JOE |
3. | 571 | 621 | ROX, TEXAS-RED |
4 | 630 | 670 | CY5 |
ПГУ-ын платформууд:
7500Бодит цагийн ПГУ-ын систем, Biorad CF96, iCycler iQ™ Бодит цагийн ПГУ-ын илрүүлэх систем, Stratagene Mx3000P, Mx3005P
Шинэ коронавирусын нуклейн хүчлийг илрүүлэх урвалжийг хүйтэн гинжээр тээвэрлэхэд хүндрэлтэй байна
Уламжлалт нуклейн хүчил илрүүлэх урвалжуудыг хол зайд тээвэрлэх үед урвалж дахь ферментийн биоидэвхтэй байдлыг хангахын тулд (-20±5) ℃ хүйтэн гинжин хэлхээ, тээвэрлэлт шаардлагатай.Температурыг стандартад хүрэхийн тулд нуклейн хүчлийн туршилтын урвалжийн хайрцаг бүрт хэдэн кг хуурай мөс шаардагддаг ч 50г-аас бага хэмжээтэй байдаг ч энэ нь хоёр, гуравхан хоног л үргэлжилнэ.Үйлдвэрийн практикийн үүднээс авч үзвэл үйлдвэрлэгчээс гаргаж буй урвалжуудын бодит жин нь савны 10% -иас бага (эсвэл энэ утгаас хамаагүй бага) байна.Жингийн ихэнх хэсгийг хуурай мөс, мөсөн сав, хөөсөн хайрцагнаас авдаг тул тээврийн зардал маш өндөр байдаг.
2020 оны 3-р сард COVID-19 гадаадад өргөн цар хүрээтэй тархаж эхэлсэн бөгөөд шинэ коронавирусын нуклейн хүчлийг илрүүлэх урвалжийн эрэлт эрс нэмэгдсэн.Хүйтэн хэлхээнд урвалжуудыг экспортлох өндөр өртөгтэй хэдий ч ихэнх үйлдвэрлэгчид их хэмжээний, өндөр ашиг олдог тул үүнийг хүлээн зөвшөөрч чаддаг.
Гэсэн хэдий ч тахлын эсрэг үндэсний экспортын бодлогыг сайжруулж, хүн амын урсгал, ложистикт тавих үндэсний хяналтыг сайжруулснаар урвалжуудын тээвэрлэлтийн хугацаа уртасч, тодорхойгүй байдал үүсч, улмаар бүтээгдэхүүний томоохон асуудал үүссэн. тээвэрлэлтээр.Тээвэрлэлтийн хугацааг уртасгасан (тээвэрлэлтийн хугацаа хагас сар орчим байдаг) нь бүтээгдэхүүн үйлчлүүлэгчид хүрэх үед байнга эвдрэлд хүргэдэг.Энэ нь ихэнх нуклейн хүчлийн урвалж экспортлогч аж ахуйн нэгжүүдэд хүндрэл учруулж байна.
ПГУ-ын урвалжийн лиофилжуулсан технологи нь шинэ коронавирусын нуклейн хүчил илрүүлэх урвалжийг дэлхий даяар тээвэрлэхэд тусалсан.
Лиофильжүүлсэн ПГУ-ын урвалжуудыг тасалгааны температурт тээвэрлэж, хадгалах боломжтой бөгөөд энэ нь тээвэрлэлтийн зардлыг бууруулаад зогсохгүй тээвэрлэлтийн явцад үүсэх чанарын асуудлаас зайлсхийх боломжтой юм.Иймд урвалжийг лиофилжүүлэх нь экспортын тээвэрлэлтийн асуудлыг шийдэх хамгийн зөв арга юм.
Лиофилизаци нь уусмалыг хатуу төлөвт хөлдөөж, дараа нь вакуум нөхцөлд усны уурыг шингээж, салгах явдал юм.Хатаасан ууссан бодис нь ижил найрлага, үйл ажиллагаатай саванд үлддэг.Уламжлалт шингэн урвалжтай харьцуулахад Liming Bio-аас үйлдвэрлэсэн шинэ төрлийн коронавирусын нуклейн хүчил илрүүлэх бүрэн бүрэлдэхүүн хэсэг бүхий лиофильжүүлсэн урвалж нь дараах шинж чанаруудтай.
Маш хүчтэй дулааны тогтвортой байдал:Энэ нь 60 хоногийн турш 56 градусын температурт зогсонги эмчилгээ хийх боломжтой бөгөөд урвалжийн морфологи, гүйцэтгэл өөрчлөгдөөгүй хэвээр байна.
Хэвийн температурт хадгалах, тээвэрлэх:Хүйтэн хэлхээ шаардлагагүй, битүүмжлэлийг задлахаас өмнө бага температурт хадгалах шаардлагагүй, хүйтэн хадгалах зайг бүрэн чөлөөлнө.
Хэрэглэхэд бэлэн:бүх бүрэлдэхүүн хэсгүүдийн лиофилизаци, системийн тохиргоо хийх шаардлагагүй, фермент гэх мэт өндөр зуурамтгай чанар бүхий бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг алдахаас сэргийлнэ.
Нэг хоолой дахь олон талт зорилтууд:илрүүлэх зорилт нь шинэ төрлийн коронавирусын ORF1ab ген, N ген, S генийг хамарч, вирусын геновариацаас зайлсхийх болно.Хуурамч сөрөгийг багасгахын тулд хүний RNase P генийг дотоод хяналт болгон ашигладаг бөгөөд ингэснээр дээжийн чанарын хяналтын эмнэлзүйн хэрэгцээг хангадаг.